
侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)或侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。近年来,随着免疫低下患者和免疫缺陷患者的增多,尤其是血液病、恶性肿瘤、艾滋病患者的增多,广谱抗生素、免疫抑制剂等广泛应用,侵袭性真菌病的发病率越来越高。由于传统的检测方法,如血培养、影像学及病理检查等方法存在着历时长、阳性率和特异性低、技术要求高等弊端,血清学检测等非培养的方法越来越受欢迎,抗原、抗体及代谢产物的血清学检查已成为主要趋势。目前,真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测(G试验)是临床上广泛应用的血清学检测技术,可以区别真菌定植和深部组织感染,是诊断侵袭性真菌病的重要辅助实验室手段。国际和国内都对侵袭性真菌病的诊断制订了标准,其中比较有权威性的是欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协作组(EORTC/IFICG)制订的侵袭性真菌病三个不同层次的诊断标准,均将G试验列入微生物学标准当中。
检测原理
(1-3)-β-D葡聚糖是真菌细胞壁的特有成分,除少数真菌(如隐球菌、毛霉、根霉等)外,大多数真菌都含有该成分。当真菌在人体中生长、繁殖或被免疫系统清除时,会释放(1-3)-β-D葡聚糖到血液或其他体液中。真菌(1-3)-β-D 葡聚糖能特异性地激活反应主剂中的 G 因子,进而激活凝固酶原,凝固酶水解反应中的显色底物,产生游离的对硝基苯胺 (pNA),从而引起吸光度变化,根据动态检测溶液吸光度变化率对真菌(1-3)-β-D 葡聚糖浓度进行定量。
检测方法
动态显色法:
方法优势
1、样本处理能力强:采用碱处理法将样本中3股葡聚糖降解为单股(1-3)-β-D葡聚糖,大大提高了检测的灵敏度。
2、2点校准:对原预设的标准曲线进行2点校准,既简化了操作程序,又能保证检测结果的准确性。
3、发色底物速率法:通过对检测整个过程吸光度平均反应速率的检测计算结果,保证检测过程的精确度。
4、双波长比色:在一定程度上提高了对某些异常标本,如黄疸、溶血或脂血标本的抗干扰能力。
5、操作简便快速:两步法操作,40分钟完成。
临床意义
1.真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测试验(G试验)阳性是侵袭性真菌感染诊断标准中重要的微生物学证据 ;
2.能够在病情轻微时进行检测,可实现侵袭性真菌感染的早期诊断;
3.缩短了检测时间,提高了检测效率,可辅助医生尽快确诊;
4.该项目可对抗真菌治疗提供用药依据和进行药效学评价 ;
5.更有利于疾病的预后,降低病死率;
6.是对国家控制抗菌药物滥用政策的积极响应。
参考文献
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